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收到大鼠骨髓間充質干細胞后如何操作?

更新時間:2022-03-15  |  點擊率:1774

大鼠骨髓間充質干細胞(BMSC)分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質間的網眼中,是一種海綿狀的組織,能產生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓基質系統內存在的骨髓間充質干細胞是一種除造血干細胞以外的、具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細胞,可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經等多種組織分化,因此可以作為組織工程中的種子細胞。在骨髓中,BMSC占骨髓有核細胞總數的0.001%-0.1%,含量極低。骨髓間充質干細胞的體外培養條件要求較高,在培養過程中,受貼壁時間、種植密度、血清含量、培養溫度和培養基pH值等條件的影響。

大鼠骨髓間充質干細胞

1.首先,觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象。若有,請及時與Procell技術支持聯系。2.用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于細胞培養箱內靜置培養,隔天再取出進行觀察。

3.仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等。

4.可將培養瓶內多余的培養基轉移至50ml無菌離心管中,備用;細胞傳代時,可以將該培養基按照一定比例和客戶自備的培養基混合使用,讓細胞逐漸適應培養條件。

5.確認細胞狀態良好后,應及時將細胞凍存,再進行后續的實驗,避免后期實驗失誤可能發生細胞污染或死亡而導致的細胞丟失。

6.建議客戶收到細胞后前3天,100X、200X、400X各拍3-5張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和Procell技術支持溝通交流。

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