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SH-SY5Y收貨常見問題及解決方案

更新時(shí)間:2022-04-29  |  點(diǎn)擊率:1156

常溫運(yùn)輸過程中,細(xì)胞不免受到震蕩和溫度變化的影響,出現(xiàn)皺縮、聚團(tuán)甚至脫落的現(xiàn)象。遇到這種情況,不用緊張,只要正確處理,細(xì)胞就能恢復(fù)正常生長。


收貨時(shí)皺縮

常溫細(xì)胞收貨后,把細(xì)胞放進(jìn)細(xì)胞培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)即可。如果4小時(shí)后細(xì)胞仍然沒有鋪展開,密度適中的前提下可以靜置過夜(過夜前倒出部分培養(yǎng)基,留5-10mL在瓶中,瓶蓋擰松)。

收貨時(shí)聚團(tuán)

常溫細(xì)胞收貨后,先把細(xì)胞放進(jìn)細(xì)胞培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)以穩(wěn)定狀態(tài),再進(jìn)行傳代。傳代用含EDTA的0.25%胰蛋白酶消化1-3min左右。

收貨時(shí)脫落

常溫細(xì)胞收貨后,先把細(xì)胞放進(jìn)細(xì)胞培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)以穩(wěn)定狀態(tài)再處理。脫落后的細(xì)胞通常聚團(tuán)漂浮,通過離心將漂浮的細(xì)胞團(tuán)收集起來,在離心管里進(jìn)行胰酶消化后重新鋪板即可。

貼壁細(xì)胞常規(guī)方法消化下來,和處理好的脫落細(xì)胞合并,混勻后鋪板。

SH-SY5Y脫落處理步驟:

1.    1200rpm(約250g)3min離心收集細(xì)胞,去除舊培養(yǎng)基;

2.    PBS 重懸細(xì)胞,再次 1200rpm(約250g)3min離心,去除PBS;

3.    加入 1mL左右 0.25%胰酶重懸細(xì)胞,吹打1-2下吹起沉淀即可;

4.    放入細(xì)胞培養(yǎng)箱約 1-3min;

5.    用移液槍輕輕吹打細(xì)胞懸液,使細(xì)胞團(tuán)分散;

6.    迅速加入 3-5mL含血清的培養(yǎng)基混勻以終止消化;

7.    1200rpm(約250g)3min離心,去除胰酶;

8.    加入新鮮培養(yǎng)基按合適比例接入無菌培養(yǎng)器皿中;

SH-SY5Y收貨時(shí)皺縮、脫落

SH-SY5Y細(xì)胞收貨時(shí)皺縮、脫落

 SH-SY5Y處理后第三天

SH-SY5Y細(xì)胞處理后第三天



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