美女又黄又免费-美女在线国产-美女中文字幕-美日韩免费视频-中文字幕一区二区三区四区五区人-中文字幕一区二区三区在线不卡

歡迎來到武漢普諾賽生命科技有限公司網站!
咨詢熱線

400-999-2100

當前位置:首頁  >  技術文章  >  細胞學堂|MEG-01培養注意事項

細胞學堂|MEG-01培養注意事項

更新時間:2023-06-30  |  點擊率:1069



基本信息

1

細胞名稱

MEG-01 (人成巨核細胞白血病細胞)

2

別名

Meg-01; MEG01; Meg01

3

細胞培養條件

RPMI-1640+10% FBS+1% P/S,37℃;5% CO2

4

生長特性

半貼半懸 

5

細胞形態

淋巴母細胞樣



背景資料


MEG-01是一種巨核母細胞系,該細胞來自于一名費城染色體(Ph)陽性的慢性粒細胞性白血病(CML)患者。1983年由Michinori Ogura, Yasuo Morishima等人從一名55歲患有慢性粒細胞性白血病(CML)且處于CML爆發危機的男性的骨髓樣本中提取。


MEG-01細胞沒懸浮的細胞大多為圓形或者卵圓形,貼壁的細胞會伸出偽足。細胞質相對嗜堿性,并含有少量空泡,還觀察到細胞質突起。單克隆抗體的間接免疫熒光試驗顯示,MEG-01細胞表面的FVIII相關抗原呈陰性,該抗原在MEG-01細胞特別是大細胞的細胞質中呈陽性。所有細胞均呈彌漫性和細顆粒狀的酸性磷酸酶強陽性。


MEG-01不僅為研究人類巨核細胞分化和成熟提供研究模型,而且為血小板或蛋白質如FVIII相關抗原、血小板糖蛋白或血小板衍生生長因子(PDGF)等的產生和釋放提供一種有用的研究模型。


細胞特性

培養中始終存在一些黑點樣碎片,不需要特殊處理。大部分細胞呈不規則圓形懸浮狀態,有少量細胞呈梭形貼壁。


培養方法


以T25瓶為例

1

該細胞為半貼壁半懸浮細胞,其中貼壁細胞較少或到50%均為正常,可以按懸浮細胞的培養方式傳代,貼壁部分吹下即可(如遇吹不下來,可用0.25%胰酶適當消化);

2

維持細胞密度在3-10×105cells/mL培養,初始接種密度不低于3×105cells/mL,長到10×105cells/mL左右進行傳代。建議前期計數后操作,后面可以根據經驗傳代;

3

每隔3天計數操作一次,如密度低于3×105cells/mL可更換小體積容器(如孔板)進行培養;

4

根據細胞密度選擇其中一種操作方法:


方法一


半換液。如密度不足8×105cells/mL則進行半換液;緩緩吸出上層一半的培養液,于1200 rpm(250g左右) 3min離心收集細胞,加入等體積新鮮培養基重懸細胞,輕輕吹打3-5次,接回原瓶繼續培養;


方法二


1:2稀釋傳代。如密度接近10×105cells/mL左右,則將細胞等體積分裝到兩個新培養瓶,每瓶分別補加新鮮培養基到總體積5mL;


方法三


全離心換液或傳代。細胞每持續培養超一周可進行一次全離心換液或者傳代,不建議頻繁用離心的方式換液或傳代;離心轉速推薦1200rpm 3min。


特殊注意事項

01


該細胞增殖較慢,比較脆弱,培養中減少觀察挪動,維持穩定的培養溫度和環境;

02


盡可能減少吹打次數,取樣計數或者傳代時輕輕吹打3-5下混勻細胞即可;

03


傳代后每天觀察細胞狀態,如果密度太大,不及時處理,細胞容易死亡,需嚴格控制培養密度;

04


至少每3天需要將細胞半換液或者傳代一次,一周左右全部離心換液一次。


凍存與復蘇

推薦凍存密度:


3~5×106 cells/mL ;


凍存液配比:


55% RPMI-1640 +40% FBS+5%DMSO,需使用程序凍存盒梯度降溫凍存。


生長圖片

圖片

圖1:建系文檔中的MEG-01細胞圖


圖片

圖2:ATCC培養圖,來源于ATCC


圖片

圖3:普諾賽培養圖




參考文獻:


[1] Ogura M, et al. Establishment of a novel human megakaryoblastic leukemia cell line, MEG- 01, with positive Philadelphia chromosome. Blood 66: 1384-1392, 1985. PubMed: 2998511






主站蜘蛛池模板: 日韩欧美国产偷亚洲清高 | 欧美精品香蕉在线观看网 | a天堂中文在线 | 一级韩国aa毛片免费观看 | 亚州综合网 | 自拍偷拍免费 | 一级特黄色大片 | 中文字幕精品一区二区三区视频 | 欧美高清另类自拍视频在线看 | 91网址在线播放 | 一级特级aaa毛片 | 日韩免费视频一区 | 国产成人在线观看免费网站 | 在线欧美国产 | 激情五月黄色 | 视频国产精品丝袜第一页 | 4hu四虎永久地址 | 日日夜夜天天人人 | 亚洲第十色| 欧美一区二区日韩一区二区 | 老妇毛片久久久久久久久 | 日韩永久在线观看免费视频 | 99在线免费观看视频 | 亚洲黄色免费网站 | 天天夜日日日日碰日日摸 | 五月婷婷在线免费观看 | 精品视频网 | 狠狠色狠狠色综合日日小蛇 | 日韩 欧美 国产 亚洲 中文 | 亚洲男人天堂2020 | 日本韩国一级 | 日韩小视频在线观看 | 国产三级精品三级 | 中文毛片无遮挡高清免费 | 亚洲永久精品网站 | 夜色321| 日韩一级片免费在线观看 | 亚洲视频免 | 国产91在线播放中文 | 青青草手机视频 | 国产色在线com |