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直播答疑 | 原代細(xì)胞培養(yǎng)常見問題解決方案

原代培養(yǎng)是指由體內(nèi)取出組織或細(xì)胞進(jìn)行的首-次培養(yǎng)，也叫初代培養(yǎng)，是細(xì)胞系建立的第一步。在9月22日開播的“原代細(xì)胞常見問題解決方案”課程中，有很多老師就原代細(xì)胞培養(yǎng)問題提出了疑問。我們篩選出部分代表性問題，并作了詳細(xì)解答。臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞需要包被嗎？選用什么包被比較好？臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞建議包被，建議選用0.1%明膠包被，包被的細(xì)胞形態(tài)會(huì)比不包被的好看。角質(zhì)細(xì)胞需要包被嗎？角質(zhì)細(xì)胞生長類似上皮細(xì)胞，營養(yǎng)環(huán)境要求高，建議使用膠原蛋白包被。細(xì)胞原皿狀態(tài)很好，傳代后細(xì)胞邊界不清楚是什么原...

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小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞的培養(yǎng)信息都在這里了

普諾賽實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞采用酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。普諾賽實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用普諾賽配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。培養(yǎng)基含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等產(chǎn)品貨號(hào)CM-M15...

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293T（人胚腎細(xì)胞）培養(yǎng)要注意這些

293T（人胚腎細(xì)胞）是剪切過的人腺病毒5(Ad5)轉(zhuǎn)染的人胚腎細(xì)胞形成的永生化細(xì)胞，細(xì)胞包含并表達(dá)轉(zhuǎn)染的Ad5基因。早期報(bào)道中指出，細(xì)胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側(cè)端和右側(cè)端的DNA，但是現(xiàn)在明確了只存在其左側(cè)端的DNA。經(jīng)過對(duì)Ad5的插入點(diǎn)的克隆測(cè)序發(fā)現(xiàn)，Ad5的1-4344位線性核苷酸整合入293[HEK-293]細(xì)胞19號(hào)染色體(19q13.2)。293[HEK-293]細(xì)胞為人類腺病毒載體擴(kuò)增的宿主，可表達(dá)異常的玻連蛋白的細(xì)胞表面受體，由整合素β1亞單...

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常用的肝癌細(xì)胞有哪些？

常用的肝癌細(xì)胞有哪些？1、SMMC-7721人肝癌細(xì)胞株SMMC-7721細(xì)胞系是于1977年建立，材料取自一名50歲男性原發(fā)性肝細(xì)胞癌HCC患者的手術(shù)切除標(biāo)本進(jìn)行體外培養(yǎng)而得。其生物學(xué)特性如下：細(xì)胞系生長較迅速穩(wěn)定，在原代細(xì)胞開始傳代階段增殖緩慢，以后趨于穩(wěn)定而迅速生長；細(xì)胞形態(tài)為上皮樣；貼壁生長；細(xì)胞的亞微結(jié)構(gòu)形態(tài)符合癌細(xì)胞的一般特征；甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)免疫熒光染色呈陽性；LDH同工酶譜的變化與肝癌細(xì)胞的一般特征一致；免疫缺陷小鼠體內(nèi)可成瘤率高...

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人單核細(xì)胞白血病是什么？

人單核細(xì)胞白血病即往認(rèn)為是骨髓增生異常綜合征的一個(gè)亞型。因期間有骨髓發(fā)育異常和骨髓增殖的特點(diǎn)。歸屬于一個(gè)新的獨(dú)立病癥，骨髓增生異常。發(fā)生于60%的患者中。偶可見齒齦潰瘍，壞死和出血。建議患者注意休息，進(jìn)食高熱量，高蛋白的食物，維持水電解質(zhì)平衡及時(shí)糾正貧血，預(yù)防感染。你好，單核細(xì)胞白血病即往認(rèn)為是骨髓增生異常綜合征的一個(gè)亞型。因期間有骨髓發(fā)育異常和骨髓增殖的特點(diǎn)。歸屬于一個(gè)新的獨(dú)立病癥，骨髓增生異常。發(fā)生于60%的患者中。偶可見齒齦潰瘍，壞死和出血。建議患者注意休息，進(jìn)食高熱量...

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原代細(xì)胞分離提取的注意事項(xiàng)

原代細(xì)胞分離是指將組織分散制成細(xì)胞懸液后從中獲取目的細(xì)胞的過程，獲得高純度、高活性的原代細(xì)胞則是很多細(xì)胞實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵要素之一，但是，很多小伙伴會(huì)在這個(gè)關(guān)鍵步驟會(huì)出現(xiàn)問題，今天我們就主要來聊聊這個(gè)問題。首先，原代細(xì)胞分離的方法有很多種：原代細(xì)胞是直接取自活組織(例如活組織檢查材料)的細(xì)胞，并建立用于體外生長。這些細(xì)胞經(jīng)歷了非常少的群體倍增，因此與連續(xù)(腫瘤或人工永生化)細(xì)胞系相比，它們更能代表它們所衍生組織的主要功能成分，使得原代細(xì)胞成為更具代表性的體內(nèi)模型。所以，自己動(dòng)手分...

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小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞是怎么制備而來的？

普諾賽實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞采用酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。細(xì)胞經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞分離自腦組織；大腦分左右兩個(gè)半球，大腦皮質(zhì)（灰質(zhì)）覆蓋著每個(gè)大腦半球的大部分，它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個(gè)半球都有三個(gè)面，即外側(cè)面（約占整個(gè)皮質(zhì)面積的1/3）、內(nèi)側(cè)面和底面（占2/3的面積）；半球...

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雞卵泡顆粒細(xì)胞的生理結(jié)構(gòu)是怎樣的？

雞卵泡顆粒細(xì)胞分離自雞卵泡組織；成熟卵泡是卵巢的組織結(jié)構(gòu)成分之一，卵泡腔很大，卵丘很明顯。卵泡內(nèi)膜細(xì)胞緊靠卵泡顆粒層，與顆粒層細(xì)胞之間有一層基膜相隔，內(nèi)膜細(xì)胞呈多邊形，胞質(zhì)清亮，胞核圓形，細(xì)胞間可見許多毛細(xì)血管，外膜細(xì)胞位于Chemicalbook最外層，多呈梭形，與周圍結(jié)締組織分界不明顯。卵泡(follicle)中卵母細(xì)胞四周有一層菱形或扁平細(xì)胞圍繞，在卵泡開始發(fā)育、卵細(xì)胞成長的同時(shí)，周圍的菱形細(xì)胞變?yōu)榱⒎叫危⒂蓡螌釉錾蓮?fù)層，因其細(xì)胞漿內(nèi)含有顆粒，故稱為顆粒細(xì)胞。初級(jí)雞...

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